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垂枝樱花抗寒砧木组织培养-三郎樱花基地

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1.2.2.1 剥取和接种腋芽 试验从1998年1~4月份分批取芽。1月份剪取当年生枝,4摄氏度低温冷藏保鲜,随用随取。本试验进行2个处理:剥取休眠芽和萌动芽接种。剥取休眠芽时,先用尖镊子或薄刀片将外鳞片剥去,樱花露出芽的生长点,用刀片切下并带部分木质部,浸入水中。接种时,在超净工作台上,先用75%的酒精迅速浸过,立即倒出,然后用升汞(0.1%的氯化汞)灭菌1.5~2min,再用无菌水冲洗4~5次后,接种于备用的培养基上。对未萌动的枝先插入水中,在20e左右的室内培养,使芽萌动。待芽萌动后,进行剥取接种。剥取萌动芽和接种的操作与休眠芽的操作相同。

1.2.2.2 培养条件 将灭菌后的腋芽接种到1~6号培养基上,置于光照培养箱内培养,温度25e,光照强度2000Lux,自动控制光照时数为12h,培养基含蔗糖3%,琼脂含量0.6%,pH5.5~5.8。

1.2.2.3 樱花苗扩大繁殖 腋芽萌动长至3~4cm高时进行2~3节切段培养,仍接种于原培养基上,观察比较不同配方的培养基对幼苗生长的影响,选择适当的培养基,使腋芽丛生化,并反复进行继代培养,使芽不断增殖,并培养生根预备苗。平均30~50d分苗1次。当苗高达到3cm以上,具备10~15片展开的深绿色叶片的转到生根培养基上,余者5~7株(包括所有新分生的可见生长点),切成1块,仍接种于原编号的培养基上扩大繁殖。

1.2.2.4 垂枝樱花生根培养 生长健壮的生根预备苗,苗高3cm以上,具备10~15片展开的深绿色叶片,则可转接到生根培养基上进行培养。

1.2.2.5 试管垂枝樱花苗移栽 当生根苗生根3~5根以上,根长3~5cm,苗高3cm以上,并具深绿色展开的叶片15片以上时,则可先打开培养瓶的瓶塞,炼苗2~3d,然后取出生根苗,洗去培养基,进行砂培或珍珠岩培养2~3周,在培养期间喷雾,保持空气相对湿度在80%以上